Андрей Смирнов
Время чтения: ~27 мин.
Просмотров: 0

Анализ кала на хеликобактер пилори: как его правильно сдавать?

506dab36a_660x300.jpg

Современные диагностические методы позволяют узнать многое о состоянии здоровья человека по его биологическим жидкостям: крови, моче, фекалиям.

Исследуя кал, можно узнать, поселилась ли в организме бактерия Н.руlori, способная вызывать гастриты, язвы желудка и провоцировать онкопатологию.

Кал на наличие или отсутствие данного микроба можно изучать тремя способами: культуральным, иммунологическим, и наиболее достоверным и распространённым – методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР).

Определение хеликобактер культуральным методом

Сама бактерия крайне редко встречается в фекалиях в своей привычной S-образной форме целиком. Толстый кишечник и каловые массы не являются благоприятной средой для микроорганизма, поэтому, попадая в них, она может принимать круглую кокковую форму, изредка встречаясь в испражнениях именно в таком виде.

Культуральный метод подразумевает под собой посев части исследуемого материала на питательную среду, в которой бактерия будет хорошо себя чувствовать и начнёт размножаться.

Таким образом:

Происходит рост колоний, которые анализируются, окрашиваются специальными реактивами и исследуются под микроскопом. Данным способом в прямом смысле выращивают патогенные микробы с целью их дальнейшего изучения.

Кроме обнаружения самой бактерии, метод позволяет установить чувствительность патогена к тому или иному антибиотику. Если при добавлении лекарственного препарата рост колонии сохраняется – Н.руlori устойчива к антибактериальному средству, а если микроорганизмы погибают – имеет смысл назначить данный препарат пациенту с целью лечения и эрадикации, бактерии чувствительны к нему.

Культуральный способ весьма достоверен, но только в том случае, если во взятом биологическом материале обнаружена S-форма микроба. Метод имеет свои недостатки, и по этой причине не слишком распространён:

  • Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
  • Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
  • Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
  • Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

Определение антигена хеликобактер пилори в кале иммунологическим методом

лабораторное-исследование-на-бактерию.jpg

Фекалии пациента могут быть подвергнуты иммунологическому исследованию, которое позволяет выявить уже не сам микроорганизм, а его части – антигены.

Для этого:

Используются специальные антитела, направленные на обнаружение чужеродного антигена – частей бактерии, продуктов её жизнедеятельности, генетического материала.

Взаимодействуя с чужеродным агентом, антитела образуют специфический комплекс, который и определяется иммуно-ферментным анализом.

Данный способ изучения кала редко применяется в России, не многие лаборатории оснащены необходимыми реактивами и необходимыми тестами.

Но в перспективе возможно включение данного способа обнаружения хеликобактер в качестве скрининг-тестов: исследования широких групп населения на заражённость бактерией.

Анализ кала ПЦР на хеликобактер пилори

Это наиболее распространённый метод исследования фекалий на данную бактерию, обладающий высокой точностью.

Суть способа в следующем:

Из биологического материала пациента выделяется участок ДНК бактерии, который затем многократно искусственно дублируется на специальном аппарате, так происходит восстановление гететического кода Н.руlori

Когда геномный фрагмент микроба достигает достаточных размеров, его сравнивают с эталонным и делают вывод об исследуемом микроорганизме: хеликобактер ли это или другой патоген.

Положительный ПЦР анализ означает наличие в организме человека хеликобактерной инфекции: бактерия присутствует в желудке, ее фрагменты ДНК обнаружены в кале и совпали с эталонными.

анализ-кала.jpg

Достоинства ПЦР-метода:

  • Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
  • Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
  • Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
  • Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

У ПЦР-диагностики значительно больше плюсов, чем минусов. К недостаткам можно отнести:

  • Относительно высокую стоимость анализа.
  • Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
  • Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори инвитро

Все диагностические исследования, проводимые с фекалиями пациента, относятся к манипуляциям ин витро – «в пробирке», «в стекле», вне организма человека.

Они обладают достаточно высокой точностью и информативностью, если преследуют цель обнаружения микроба.

Но не все процессы, происходящие «ин виво» — внутри человеческого организма, можно с той же достоверностью воссоздать «ин витро». К примеру, определение чувствительности к антибиотикам, анализируемую культуральным методом.

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

Результаты исследований чувствительности бактерии к антибиотикам «в пробирке» не всегда точны.

Как сдать анализ кала на хеликобактер пилори

Информативность диагностического теста зависит не только от выбранного исследования, качества оборудования и квалификации персонала, а еще и от того, как пациент подготовился к анализу.

Кал для исследования необходимо правильно собрать:

  • После дефекации часть фекальных масс необходимо поместить в стерильный контейнер для сбора биологического материала, который нужно заранее приобрести в аптеке или в лаборатории.
  • Исключить попадание в биологический материал крови, мочи, слюны, гноя и других посторонних примесей, которые с большой вероятностью исказят результаты анализа.
  • Контейнер с содержимым необходимо плотно закрыть и доставить в лабораторию не позднее 4-5 часов до исследования.

Кроме соблюдения технических моментов сбора материала для анализа, на протяжении нескольких дней до сдачи кала, нужно соблюдать следующие рекомендации:

  • За неделю до сдачи перестать принимать антибиотики.
  • За три дня не употреблять алкоголь, пищу, с большим содержанием клетчатки, а также способную приводить к окраске каловых масс: свеклу, напитки с красителями.
  • Не применять ректально свечи либо мази, не пользоваться слабительными препаратами.

Соблюдение вышеописанных правил позволить врачу лабораторной диагностики максимально точно оценить состояние здоровья пациента и сделать правильные выводы при анализе.

Достоверность анализа кала на хеликобактер

ПЦР — диагностика фекалий наиболее достоверна из всех трех вышеописанных способов, она в какой-то степени уступает лишь биопсийному эндоскопическому исследованию.

ПЦР-анализ кала редко дает ложноположительные результаты, обладает высокой специфичностью, позволяет исследовать ДНК-материал часто встречаемых кокковых форм хеликобактерий в испражнениях.

Достоверность культурального и иммунологического метода ниже, чем ПЦР. Эти методы «грешат» появлением ложноположительных результатов, но в совокупности с другими способами выявления Helicobacter pylori, они являются прекрасным подспорьем для постановки диагноза.

Антиген H.pylori в фекалиях

В случае, если в кале обнаружен антиген хеликобактер пилори либо ДНК-фрагмент исследуемого микроорганизма, это означает, что:

  • Человек инфицирован Н.руlori.
  • Эрадикационная терапия недостаточно эффективна и микроб не исчез из слизистой оболочки ЖКТ.
  • Прошло меньше месяца после терапии и в кале сохраняются антигены умертвлённых патогенов.

Чтобы исключить ложноположительный результат после прохождения схемы антихеликобактерной терапии (когда анализ положительный, а организм человека не содержит Н.рylori), следует не торопиться узнавать эффективность лечения, а выждать не менее одного месяца после его окончания.

Если лечение бактерии проведено успешно, спустя 1 месяц после эрадикации в кале не выявляются антигены и ДНК микроба. Результат обследования – отрицательный.

В случае выявления антигенов при первичном анализе, врач порекомендует пациенту пройти курс специальной терапии, направленной на уничтожение Н.руlori.

Проблемы с желудком доставляют огромный дискомфорт и подчас мешают вести привычный образ жизни. Боли в области живота, тошнота, отрыжка, тяжесть в желудке способны разрушить любые планы и надолго выбить из колеи. Ситуация серьезно осложняется, если такие явления обретают хронический характер. В чем может крыться причина желудочных расстройств и как ее устранить? Давайте в этом разберемся.

Что такое хеликобактер пилори и зачем нужен анализ

Очень часто проблемы с желудком вызывает коварная бактерия — хеликобактер пилори ( Helicobacter pylori ). Она имеет спиралевидную форму, является патогенной бактерией-паразитом, производит множество токсинов, поражающих слизистую оболочку желудка и двенадцатиперстной кишки — именно в этих органах она обитает. Хеликобактер пилори приводит к воспалительным процессам, таким как гастрит, язва и ряду других, появление которых еще не так давно объясняли генетической предрасположенностью и нарушением здорового питания. Доказано, что в ряде случаев гастрит и язва вызваны именно инфицированием этой бактерией. То есть этими заболеваниями, оказывается, можно так же легко заразиться, как и гриппом.

Причем если большинство бактерий гибнет в кислой желудочной среде, то хеликобактер пилори в ней очень даже жизнеспособна. Она легко приспосабливается к агрессивной среде и без особого труда передвигается по стенкам внутренних органов благодаря специальным жгутикам на ее поверхности.

Кстати За вклад в изучение бактерии хеликобактер пилори ученые Барри Маршал и Робин Уоррен в 2005 году получили Нобелевскую премию в области медицины. Именно они опровергли медицинскую доктрину о роли стресса, острой пищи и повышенной кислотности в этиологии язвы.

В России распространенность бактерии очень велика — в разных регионах инфицировано от 70 до 90% населения, что значительно выше показателей Европы и США. Это объясняется сравнительно низким уровнем жизни большинства россиян, как следствие — пренебрежение правилами гигиены, проживание в антисанитарных условиях. В Москве, как наиболее развитом городе России, количество инфицированных не превышает 60% (речь идет о зарегистрированных гражданах).

Как правило, поводом для назначения анализа на хеликобактер пилори становятся следующие симптомы:

  • Боли в желудке после приема пищи.
  • Частая отрыжка.
  • Повторяющаяся изжога.
  • Затруднение во время глотания пищи.
  • Метеоризм и урчание в животе.
  • Тошнота и рвота.
  • Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
  • Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
  • Появление крови во время рвоты и дефекации.

Разумеется, перечисленные симптомы вовсе не указывают на инфекцию. Подтвердить или опровергнуть ее присутствие может только лабораторный анализ.

Профилактика заражения хеликобактер пилори

  • Обязательно мойте руки перед едой.
  • Не пейте и не ешьте из чужой посуды.
  • Не откусывайте от чужого яблока или бутерброда, когда вам предлагают его попробовать. Объясните детям, что так делать нельзя.
  • Не используйте чужую зубную щетку.
  • Избегайте приветственных поцелуев с не очень близкими людьми.

Виды анализа на хеликобактер пилори

Выявить присутствие коварной бактерии в организме можно разными способами.

Анализ кала

Этот анализ является качественным, то есть отвечает на вопрос, есть ли хеликобактер пилори в организме или нет. Исследование проводится в лаборатории методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Анализ отличается высокой точностью — до 95%. Данный анализ является самым простым видом диагностики. Его рекомендуют детям, пожилым людям и тяжелобольным пациентам.

Анализ крови

  • Иммуноферментный анализ (ИФА). Антиген хеликобактер пилори в человеческом организме вызывает ответную реакцию иммунной системы — выработку антител, или иммуноглобулинов. Данный анализ, как и анализ кала, является качественным. В роли биоматериала выступает венозная кровь. Помимо описанных выше симптомов и состояний, этот анализ также назначают в качестве профилактического обследования лицам, имевшим бытовые контакты с людьми, страдающими заболеваниями желудочно-кишечного тракта.
  • Метод вестерн-блота. Данное исследование проводится, если у пациента обнаружены антитела к хеликобактер пилори. Этот анализ является более специфичным методом диагностики, так как дает дифференцированные сведения об антителах. Точность определения количества антител достигается путем разделения с помощью электрофореза белков экстракта бактерии. Биоматериал для исследования — венозная кровь.

Как сдавать биоматериал на анализ хеликобактер пилори

Точность результатов исследования зависит не только от лаборатории, но и от соблюдения ряда простых правил подготовки к анализу.

Подготовка к анализу кала

Как минимум за месяц до исследования пациент не должен принимать никаких антибиотиков. Кроме того, за трое суток до забора биоматериала необходимо отказаться от «красящих» продуктов (свекла, виноград, черная смородина, красное вино и другие) и продуктов, содержащих грубую клетчатку (капуста, морковь, редис, редька, свекла, отруби). Также нельзя принимать препараты, стимулирующие перистальтику желудка.

Кал собирают в специальный контейнер, купленный в аптеке. Если контейнер будет заполнен на 1/3, этого будет достаточно для анализа. Ни в коем случае нельзя брать кал из унитаза — в биоматериал могут попасть дезинфицирующие средства. Доставить материал в лабораторию для анализа нужно как можно быстрее. Максимальное время его хранения — 10–12 часов при температуре +2…-8 градусов Цельсия.

Подготовка к анализу крови

Накануне анализа следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, отказаться от алкоголя и жирной пищи. Кровь берут из вены натощак в утренние часы. Сама по себе процедура достаточно безболезненна и длится всего несколько минут. Однако пациенты по-разному ее переносят. Поэтому если организм ослаблен, то сразу после забора крови рекомендуется выпить сладкий чай или съесть кусочек черного шоколада — это поможет избежать головокружения. Чтобы не образовалась гематома на месте ввода иглы, после процедуры руку нужно несколько минут подержать согнутой в локте.

Расшифровка результатов

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

Анализ кала

Этот анализ готовится один день. Так как исследование является качественным, то на бланке может содержаться один из двух вариантов ответа: «отрицательный» или «положительный».

Анализ крови

  • Иммуноферментный анализ. Результаты анализа на антитела готовятся в течение одного дня, не считая дня сдачи анализа. При необходимости возможна срочная подготовка результатов, она займет всего 2–3 часа. В разных лабораториях могут использоваться разные единицы измерения. Одна из наиболее распространенных — Ед/мл.

Результаты трактуются следующим образом:

«Положительно»

«Сомнительно»

«Отрицательно»

  • Вестерн-блот . Это исследование в силу своей сложности проводится дольше — до шести рабочих дней. В результатах анализа указывают наличие и интенсивность полос тест-системы, свидетельствующих о присутствии антител класса IgA к различным антигенам хеликобактер пилори. Результат исследования сопровождают заключением с указанием: «отрицательный», «положительный» или «неопределенный».

Положительный результат говорит о заражении инфекцией хеликобактер пилори. Присутствие антител класса IgA к данной инфекции коррелирует с активностью гастрита.

Отрицательный результат может означать отсутствие антител класса IgA к хеликобактер пилори в крови инфицированного человека или ремиссию существующего заболевания.

Неопределенный результат — рекомендуется повторить тестирование через 10–14 дней. Обнаружить бактерию хеликобактер пилори можно разными способами. Выбор метода исследования зависит от многих факторов. Однако все описанные виды лабораторных анализов отличаются точностью и позволяют врачу представить клиническую картину.

Обнаружив в организме хеликобактер пилори, решение о ее эрадикации (уничтожении) специалист принимает исходя из анамнеза пациента. Бактерия эффективно уничтожается с помощью антибиотиков (кларитромицин, амоксициллин). Эрадикация необходима, если у больного диагностированы язва или гастрит. При отсутствии должного лечения патологии будут развиваться, наихудший прогноз — рак желудка.

Однако если хеликобактер пилори не причиняет носителю беспокойства, не вызывает болей, не спровоцировала развитие язвы или гастрита, то ее уничтожение — вопрос спорный. Применяемые сегодня антибиотики могут нанести вред здоровью, и решить, какое из двух зол — наибольшее, должен опытный врач.

Анализ кала на хеликобактер пилори – это достоверное доказательство наличия в организме человека бактерии, вызывающей язвенную и множество других болезней пищеварительного тракта человека. Такой анализ является прямым доказательством, если обнаруживается либо сам хеликобактер, либо его ДНК. Достоверность анализа самая высокая изо всех известных.

Как правильно сдавать анализ?

От правильности подготовки и сбора материала зависит результат. Присутствия человека не требуется, достаточно вовремя доставить правильно собранный материал.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке нужно неукоснительно соблюдать такие правила:

  • сдавать кал на анализ не раньше, чем через 1 месяц после последнего приема антибиотиков;
  • в течение 3-х суток, предшествовавших сбору материала, нельзя употреблять красящие продукты (чай, кофе, красные и оранжевые фрукты и овощи, куркуму, карри, соевый соус),
  • исключить грубую клетчатку – капусту, редьку, редис, перловую кашу, отруби, свеклу;
  • нельзя принимать лекарства, усиливающие моторную функцию кишечника – Лактулозу, Мотилиум и подобные;
  • отказаться от алкоголя;
  • не принимать антацидных средств (Альмагель и подобные);
  • собирать материал в течение первой недели после возникновения симптомов болезни (далее концентрация хеликобактера в кале уменьшается).

Для подготовки достаточно 3-х дней. В это время желательно отказаться от всех лекарств (если сделать этого нельзя, сообщить врачу названия и дозировку). Нужно сократить употребление рыбы и мяса, готовить их на пару или варить. Лучшая еда на это время – каши и кисломолочные продукты, овощные и фруктовые пюре, слабые супы, нейтральные натуральные соки (яблочный, белый виноградный), компоты, морсы, слабый чай, отвар шиповника.

Рекомендуем почитать:

Анализ кала на кальпротектин: что показывает и как его сдавать?

Подготовка тары

Некоторые лаборатории выдают тару для анализа, включая их стоимость в общую цену. Это лучший вариант. Емкость для кала можно приобрести в аптеке, стоимость несколько рублей. Контейнер продается в стерильном состоянии, его нельзя открывать, протирать или промывать. К крышке прикреплена пластиковая ложечка, которой материал набирается.

В самом крайнем случае можно воспользоваться стеклянной банкой с хорошо подогнанной крышкой (из-под детского питания). Банку нужно хорошо вымыть, а затем прокипятить вместе с крышкой и ложкой или другим предметом, которым будет набираться кал. Если на посуде останутся бактерии, анализ окажется неверным.

Сбор материала

Собирать материал из унитаза или памперса нельзя. Унитаз нужно накрыть чистым полиэтиленовым пакетом, а вместо памперса (ребенку или лежачему больному) подстелить клеенку. Допускается забор материала из чистого горшка.

Контейнер заполняется не более чем на одну треть, плотно закрыть крышкой. К посуде прикрепить направление или написать на этикетке (разборчиво) фамилию и имя пациента, год рождения.

Как и сколько можно хранить материал?

Контейнер с материалом доставляется в лабораторию как можно раньше, оптимально в день забора. Если возможности срочной доставки нет, допускается хранение в холодильнике не более 2-х суток при температуре не выше +4 °С. При необходимости более длительного хранения материал однократно замораживают при температуре -20 °С.

Методики анализа и расшифровки показателей

Биологический материал можно исследовать разными способами.

Метод Сроки проведения Расшифровка результатов
ПЦР 1 рабочий день
  • отрицательно;
  • положительно
Бакпосев от 6 до 12 дней
  • не обнаружено
  • 1 степень – нет роста на твердой среде;
  • 2 степень – 10 колоний;
  • 3 степень – до 100 колоний в твердой среде;
  • 4 степень – выше 100 колоний
ИФА Материал – венозная кровь, в течение рабочего дня, срочно за 2 часа
  • положительно – 1,1 Ед/мл, высокий риск;
  • сомнительно – от 0,9 до 1,1 Ед/мл , рекомендуется повтор через 2 недели;
  • отрицательно – ниже 0,9 Ед/мл, риск низкий

Рекомендуем почитать:

Сколько, как и где можно хранить кал для анализа: ответы на частые вопросы

Другие способы выявления хеликобактера

При обследовании используют обычно несколько методов, чтобы окончательно убедиться в наличии или отсутствии хеликобактера:

  • Дыхательный тест. Выполняется выдох в подготовленный мешочек, затем дают выпить медицинский радиоактивный углерод, через 10 или 30 минут нужно выдохнуть в другой мешочек. Обнаруживает присутствие хеликобактера в самых малых количествах.
  • Быстрый уреазный тест желудочного биоптата. Основан на том, что бактерия выделяет уреазу, расщепляющую мочевину на аммиак и СО2. Во время эндоскопического осмотра берут 4 биоптата с разных участков желудка, помещают в ячейки CLO-теста. Чем больше хеликобактера, тем быстрее меняется цвет ячейки.
  • Антиген хеликобактера в кале. Частички бактериальной стенки вступают в реакцию с моноклональным антителом, от этого изменяется цвет индикатора. Выпускаются тест-кассеты для домашнего использования. По инструкции кал смешивают с растворителем (прилагается пробирка с ним), несколько капель наносят в окно кассеты. Две полоски – положительно, одна – отрицательно. Дополнительно по маркировке можно узнать, действителен ли тест.
  • Гистологическое исследование биоптата. Полученный при ФГДС биоптат (5 образцов) окрашивают по различным методикам, чувствительность анализа доходит до 99%.
  • Вестерн-блот. Проводят у тех, у кого обнаружены антитела к хеликобактеру методом ИФА (описано выше). Определяется количество антител каждого класса (A,G,M).

Набор диагностических тестов зависит от оснащенности лечебного учреждения. «Золотым стандартом» считается гистологическое исследование. Однако положительный результат хотя бы двух разных тестов считается достаточным для того, чтобы подтвердить присутствие бактерии.

Что делать при положительном анализе?

Как можно скорее посетить гастроэнтеролога, чтобы выяснить, нужно ли проводить эрадикацию (удаление из организма) бактерии. Это неоднозначный процесс, есть противопоказания, консультация врача необходима.

После оценки уровня здоровья врач выбирает одну из схем, утвержденных международным сообществом. В зависимости от особенностей патологического процесса используются лекарственные сочетания препаратов таких групп:

  • ингибиторы протонной помпы – Омепразол, Рабепразол и другие;
  • кларитромицин – антибиотик группы макролидов;
  • амоксициллин – полусинтетический пенициллин;
  • метронидазол – противопротозойный препарат с антибактериальной активностью;
  • препараты висмута – противоязвенные, оказывающие защитное действие на слизистую желудка;
  • тетрациклин – антибиотик широкого спектра действия.

Рекомендуем почитать:

Грибы Кандида в кишечнике: симптомы и лечение (питание, препараты, народное)

В процессе лечения тесты на хеликобактер могут повторяться, чтобы отслеживать эффективность лечения.

После обнаружения и удаления бактерии язвы и другие поражения слизистой заживают полностью, а также прекращаются все вторичные нарушения – восстанавливается микрофлора, синтез витаминов и гормонов, пищеварение, снижается риск развития рака желудка.

Бактерия Helicobacter pylori (хеликобактер пилори) обитает в клетках слизистой оболочки желудка и двенадцатипёрстной кишки человека. Некоторые штаммы (генетические типы) микроорганизма выделяют специфические токсины, разрушающие клетки и повышающие риск возникновения таких патологий, как хронические гастриты и дуодениты, язвенная болезнь желудка и двенадцатипёрстной кишки, некоторые виды злокачественных опухолейа. Такие штаммы необходимо своевременно выявлять и лечить. Одним из способов определения инфицирования Helicobacter pylori является анализ кала.

Механизм определения хеликобактера с помощью анализа кала

ПЦР (полимеразная цепная реакция), культуральный и иммунологические анализы кала относятся к прямым методам исследования. В отличие от косвенных методов, когда о наличии патологического агента судят по присутствию продуктов его жизнедеятельности или реакции иммунной системы организма (выработка антител), прямые методы обнаруживают непосредственно сам микроорганизм или его ДНК. Все виды анализа кала на хеликобактериоз являются неинвазивными (нетравматичными) видами исследования в отличие от забора крови или гастродуоденоскопии.

Молекулярная диагностика

Для проведения ПЦР используют специальный прибор — амплификатор

ПЦР-метод является одним из видов молекулярно-генетической диагностики и позволяет определить наличие Helicobacter pylori даже в случае присутствия в материале небольшого фрагмента ДНК бактерии.

Суть метода состоит в многократном умножении анализируемого образца возбудителя заболевания. Для проведения реакции необходим своего рода «каркас», состоящий из двух праймеров – полученных с помощью искусственного синтеза фрагментов ДНК, идентичных нуклеиновой кислоте Helicobacter pylori. Во время реакции между праймерами наращивается цепочка ДНК в случае присутствия в кале фрагмента биоматериала микроорганизма. В случае его отсутствия реакции не происходит.

Реакция проводится при определённых значениях температуры и кислотности среды, состоит из нескольких десятков повторяющихся циклов, для катализа (ускорения реакции) применяется специальный фермент – полимераза. За 30 циклов фрагмент ДНК патологического агента, присутствующий в биоматериале, умножается в миллиард раз, что позволяет с точностью диагностировать инфекцию.

При наличии соответствующих праймеров можно выявить инфицирование цитотоксичными (повреждающими клетки слизистой желудка) видами Helicobacter pylori.

Культуральный анализ

Культуральный анализ (бактериологический посев) является микробиологическим методом исследования.

Биологический материал помещается в специфическую среду, благоприятную для роста бактериальной колонии. По истечении определённого срока (для Helicobacter pylori – более недели) культуру изучают под микроскопом, используя для верной идентификации колонии различные методы – окраску, способность вступать в те или иные биохимические реакции.

Кроме выявления патологического антигена (возбудителя заболевания) метод позволяет провести тест на его чувствительность к антибактериальным препаратам, что сокращает сроки и затраты на лечение, повышает эффективность терапии.

К сожалению, в некоторых случаях результаты теста на чувствительность in vitro («в пробирке») могут не совпадать с результатами лечения in vivo (живого организма): в жизни антибиотики, подобранные лабораторным методом, могут быть не столь эффективны.

Иммунологические методы анализа

Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело.

Показания к проведению обследования

Все виды диагностики инфицирования Helicobacter pylori имеют свои преимущества и недостатки. Целесообразность применения того или иного метода зависит от разных факторов и этапов лечения. Оптимальный способ исследования выбирает врач-гастроэнтэролог.

Показания к ПЦР-анализу кала:

  • язвы, эрозии желудка и двенадцатипёрстной кишки;
  • атрофия слизистой оболочки желудка;
  • полипы, опухоли желудка;
  • гастроэзофагеальный рефлюкс (заброс содержимого желудка в пищевод), язва пищевода;
  • генетическая предрасположенность: злокачественные опухоли желудка у ближайших родственников (родителей, родных братьев и сестёр);
  • контроль эффективности антибиотикотерапии.

Исследование ПЦР-методом оптимально назначать для оценки целесообразности проведения специфического лечения антибактериальными препаратами при имеющихся органических повреждениях.

Показание к культуральному анализу – определение чувствительности к лекарственным препаратам при неэффективности эмпирического лечения. Поскольку анализ является сложным (посев требует специальной среды и отсутствия доступа кислорода) и долгосрочным, это исследование не назначается для диагностики инфекции.

Бактериологический посев способен выделять только спиралевидные формы Helicobacter pylori, но не кокковые, получившие в последнее время широкую распространённость. Этот факт дополнительно снижает ценность исследования.

Показания к иммунологическим методам:

  • симптомы функциональных и органических патологий желудка и кишечника:
    • метеоризм, изжога, отрыжка;
    • боли, имеющие периодичность в течение суток с обострениями весной и осенью;
    • поносы или запоры;
    • ощущение дискомфорта, переполнения желудка;
  • перед назначением длительной терапии нестероидными противовоспалительными препаратами или ингибиторами протонной помпы (средствами для снижения выработки соляной кислоты);
  • железодефицитная анемия или тромбоцитопения невыясненной этиологии;
  • генетическая предрасположенность;
  • инфицирование ближайшего окружения;
  • контроль эффективности антибиотикотерапии.

Иммунологические методы и ПЦР без генотипирования назначаются с целью скрининга – ввиду простоты и относительно низкой стоимости исследование проводится широким массам населения для выявления группы риска развития органических и опухолевых поражений желудка и кишечника.

К сожалению, в России скрининг на Helicobacter pylori не получил широкого распространения.

Иммунологический анализ проводится до инструментальных методов исследования при соответствующей симптоматике и позволяет предположить инфицированность Helicobacter pylori. По результатам анализа в случае необходимости назначаются другие методы исследования.

Преимущества и недостатки ПЦР-анализа кала

Специфическая терапия хеликобактериоза антибактериальными препаратами – процесс длительный, сопровождающийся плохой переносимостью у многих больных и высоким риском развития осложнений.

Назначение антибиотиков всем лицам, инфицированным Helicobacter pylori, — порочная практика. Специфическая антибиотикотерапия показана лишь пациентам с тенденцией к прогрессированию органических поражений – эрозий, язв, атрофического процесса, — как правило, заражённым определёнными штаммами хеликобактера. Этим больным требуется антибиотикотерапия с целью достижения ремиссии при язвенной болезни и предупреждения риска развития злокачественных новообразований.

Выявить цитотоксичные типы Helicobacter pylori можно только посредством ПЦР-метода.

Преимущества ПЦР-анализа кала:

  • высокая чувствительность метода;
  • высокая специфичность теста;
  • простота и неинвазивность забора материала;
  • безопасность;
  • возможность выделения как спиралевидных, так и кокковых форм Helicobacter pylori;
  • возможность выделения различных штаммов бактерии.

Чувствительность теста – способность к выдаче истинно положительных результатов. Чем выше чувствительность, тем ниже доля ложноположительных результатов, когда антиген якобы выявляется у неинфицированных лиц.

Специфичность теста – показатель, зависящий от количества ложноотрицательных (когда у инфицированного больного антиген не выделяется) результатов исследования. ПЦР-метод исследования кала на Helicobacter pylori характеризуется чувствительностью 64–94% и стопроцентной специфичностью.

Собрать кал легко и просто. В отличие от забора крови или гастродуоденоскопии взятие материала не требует применения местных анестетиков, на которые может развиться аллергическая реакция, не причиняет боли и дискомфорта, безопасно в плане заражения «грязным» инструментом. Исследование не требует приложения определённых усилий, как, например, дыхательный метод, что делает его доступным даже для маленьких детей.

Недостатки ПЦР-анализа кала:

  • отсутствие возможности определения чувствительности к антибактериальным препаратам;
  • отсутствие возможности различать текущую инфекцию и успешно излеченную, когда фрагменты ДНК бактерии могут оставаться в фекалиях около месяца;
  • более низкий показатель чувствительности по сравнению с исследованием биоптата (образца ткани или клеточной массы) слизистой желудка;
  • относительно высокая стоимость анализа с генотипированием;
  • строгие требования к персоналу: квалификация, неукоснительное соблюдение правил, аккуратность.

Один из основных недостатков ПЦР-метода является продолжением его основного достоинства: высокая чувствительность теста является причиной ложноположительных результатов в случае контаминации («загрязнения» извне) анализируемого материала.

Подготовка к сдаче анализа

Достоверность результата любого анализа зависит от чёткого выполнения определённых условий на всех этапах, и забор материала – не исключение.

Правила взятия материала:

  • за трое суток до анализа отменяются антибиотики, слабительные, замедляющие перистальтику препараты, ректальные свечи и некоторые другие лекарства по наставлению врача, поэтому следует предупредить доктора о применении тех или иных лекарственных препаратов;
  • сбор кала осуществляется в выданную лабораторией посуду, рекомендуется отбирать пробы из трёх разных точек;
  • биоматериал желательно доставить в лабораторию немедленно; в случае отсутствия такой возможности пробу следует хранить при температуре 2–8 градусов не дольше 24 часов;
  • если анализ выполняется для оценки эффективности назначенной ранее антибиотикотерапии против Helicobacter pylori, кал собирается не ранее, чем через четыре недели после окончания лечения.

Замедление пассажа каловых масс, запоры могут приводить к разрушению хеликобактера в фекалиях, что является причиной ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности результата врач может назначить перед анализом лёгкое слабительное – лактулозу.

Как и где сдать анализ

Анализы назначает гастроэнтеролог, поэтому перед исследованием на Helicobacter pylori необходима его консультация.

Примерная стоимость исследования кала:

  • ПЦР-метод с генотипированием – 1200 рублей;
  • ПЦР без генотипирования – 600 рублей;
  • чувствительность к антибиотикам – 600 рублей;
  • иммунологические методы – 400–650 рублей (в зависимости от метода).

Для наиболее точной диагностики Helicobacter pylori необходимо выбирать медицинское учреждение, заслужившее хорошую репутацию.

Результаты исследования

Период обработки анализов, их достоверность зависят от метода определения антигена.

Сроки выполнения, достоверность и интерпретация результатов анализов кала на хеликобактериоз.

Сроки Достоверность Результаты
ПЦР от 5–6 часов (экспресс-метод) до 2 дней высокая

1) отрицательный – не выделено ни одного заявленного генотипа бактерии;

2) положительный – хелибактериоз (текущий или в анамнезе), выделено не менее одного из заявленных генотипов

7–10 дней высокая – на чувствительность;

низкая – на выявление антигена

1) количество бактерий 0 – хеликобактер не выделен;

2) количество >0 — хелибактериоз;

3) S – чувствительность к указанному антибиотику;

4) R – резистентность (устойчивость) к антибиотику;

5) I – умеренная чувствительность к антибиотику.

Иммунологические методы 1 день низкая

Низкая достоверность иммунологического и культурального анализа объясняется малымсодержанием антигена в фекалиях: если ПЦР-анализ чувствителен и при наличии 10 клеток, то для достоверного результата других методов клеток должно быть хотя бы в 10 раз больше.

Исследование кала на хелибактериоз безопасно, нетравматично и может осуществляться разными методами, позволяющими обнаружить инфекцию, определить штаммы вируса и чувствительность патогена к антибиотикам.

По результатам анализов можно сформировать группу риска, у представителей которой высока вероятность развития язвы желудка и двенадцатипёрстной кишки, злокачественных опухолей желудка; оценить степень риска и минимизировать его своевременным антибактериальным лечением цитотоксичных штаммов хеликобактериоза.

string(42) «helicobacter-pilori-opredelenije-antigenov» 049001

Стоимость услуги: 860 руб.*1720 руб. На дому
Срок исполнения: до 1 к.д.3 — 5 ч.**
Указанный срок не включает день взятия биоматериалаarray(19) { [«catalog_code»]=> string(6) «049001» [«name»]=> string(206) «Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод)» [«period»]=> string(1) «1» [«period_max»]=> string(1) «0» [«period_unit_name»]=> string(6) «к.д.» [«cito_period»]=> string(1) «3» [«cito_period_max»]=> string(1) «5» [«cito_period_unit_name»]=> string(3) «ч.» [«group_id»]=> string(4) «2543» [«id»]=> string(4) «3565» [«url»]=> string(42) «helicobacter-pilori-opredelenije-antigenov» [«podgotovka»]=> string(624) «

Нельзя собирать кал в памперсы, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов. Небольшое количество кала забирают из разных мест одноразовой лопаточкой (4-5 раз). Следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

» [«opisanie»]=> string(4258) «

Helicobacter pylori – бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с H.pylori.

Все многообразие методов обнаружения хеликобактерной инфекции основано на определении собственно H. pylori (прямые методы) либо продуктов активной жизнедеятельности бактерии (уреазный дыхательный тест), а также подразделяются на инвазивные (гастроскопия) и неинвазивные. На V Маастрихтской согласительной конференции во Флоренции (2015 г.) одним из основных неинвазивных методов, который рекомендуется для стратегии «test-and-treat» («выявляй и лечи»), признан тест по определению антигенов H.pylori в кале.

Образцы кала лучше исследовать в период обострения болезни, т.к. через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается. Определение антигенов H. pylori в кале в международной практике служит не только методом диагностики инфекции H.pylori, а также широко используется для диагностики успешности эрадикационной терапии (не ранее чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний). Отсутствие антигенов возбудителя в кале через 4 недели после окончания лечения свидетельствует об успешности эрадикационной терапии.

Показания к назначению исследования:

  • первичная диагностика хеликобактерной инфекции;
  • оценка эффективности эрадикационной терапии.

Интерпретация результатов

Пример результата (вариант нормы):

Параметр Результат Референсные значения
Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод) Не обнаружено Не обнаружено

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

» [«serv_cost»]=> string(3) «860» [«cito_price»]=> string(4) «1720» [«parent»]=> string(2) «25» [10]=> string(1) «1» [«limit»]=> NULL [«bmats»]=> array(1) { [0]=> array(3) { [«cito»]=> string(1) «Y» [«own_bmat»]=> string(2) «12» [«name»]=> string(6) «Кал» } } }

Биоматериал и доступные способы взятия:
Тип В офисе
Кал
Подготовка к исследованию:

Нельзя собирать кал в памперсы, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов. Небольшое количество кала забирают из разных мест одноразовой лопаточкой (4-5 раз). Следует избегать примеси мочи и выделений из половых органов.

Описание

Helicobacter pylori – бактерия в форме спирали, которая поражает стенку желудка и двенадцатиперстной кишки, вызывая атрофический гастрит, язвенную болезнь и злокачественные образования. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки практически в 100% случаев ассоциирована с H.pylori.

Все многообразие методов обнаружения хеликобактерной инфекции основано на определении собственно H. pylori (прямые методы) либо продуктов активной жизнедеятельности бактерии (уреазный дыхательный тест), а также подразделяются на инвазивные (гастроскопия) и неинвазивные. На V Маастрихтской согласительной конференции во Флоренции (2015 г.) одним из основных неинвазивных методов, который рекомендуется для стратегии «test-and-treat» («выявляй и лечи»), признан тест по определению антигенов H.pylori в кале.

Образцы кала лучше исследовать в период обострения болезни, т.к. через неделю после проявления симптомов активной инфекции количество бактерий в фекалиях сокращается. Определение антигенов H. pylori в кале в международной практике служит не только методом диагностики инфекции H.pylori, а также широко используется для диагностики успешности эрадикационной терапии (не ранее чем через 4 недели после окончания курса антихеликобактерной терапии, либо после окончания лечения любыми антибиотиками или антисекреторными средствами сопутствующих заболеваний). Отсутствие антигенов возбудителя в кале через 4 недели после окончания лечения свидетельствует об успешности эрадикационной терапии.

Показания к назначению исследования:

  • первичная диагностика хеликобактерной инфекции;
  • оценка эффективности эрадикационной терапии.

Интерпретация результатов

Пример результата (вариант нормы):

Параметр Результат Референсные значения
Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori), качественное определение антигенов (иммунохроматографический экспресс-метод) Не обнаружено Не обнаружено

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.

* Цена указана без учета стоимости взятия биоматериала. При единовременном заказе нескольких услуг, услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.** Указанные сроки выполнения исследований действуют только при приеме биоматериала с 9 утра. Анализы в режиме CITO, сданные с 7.30 до 9 утра, будут готовы через 6 часов. Готовность всех анализов, взятых после 19.00, будет переходить на следующий день.Используемые источники:

  • https://bolvzheludke.ru/poleznoe/analiz-kala-na-helikobakter/
  • https://www.kp.ru/guide/analiz-na-khelikobakter-pilori.html
  • https://prokishechnik.info/obsledovaniya/analiz-kala-na-helikobakter-pilori.html
  • https://lechenie-simptomy.ru/metody-issledovaniya-kala-na-helikobakter-pilori
  • https://www.cmd-online.ru/analizy-i-tseny/helicobacter-pilori-opredelenije-antigenov/

Рейтинг автора
5
Подборку подготовил
Андрей Ульянов
Наш эксперт
Написано статей
168
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации