Андрей Смирнов
Время чтения: ~27 мин.
Просмотров: 9

Алгоритм серологической диагностики гепатитов — Eurolab

Если нет достаточных клинических и эпидемиологических данных для предварительного предположения этиологии гепатита, на первом этапе исследуются следующие  серологические маркеры:

  • HAVAb, IgM (острая форма гепатита А)
  • HEVAb, IgM (острая форма гепатита Е)
  • HBsAg, HBcAb (гепатит В)
  • HCVAb (гепатит С)

При положительной реакции на HВsAg и (или) суммарные НВсorAb необходима дальнейшая уточняющая диагностика стадии инфекционного процесса, тестирование:

  • HBcAb, IgM
  • HBsAb
  • HВeAg
  • HBeAb
  • HBV, DNA

Длительная персистенция НВсorAb, при отрицательных тестах HВsAg и  НВsAb может  являться единственным маркером хронической инфекции мутантным штаммом  вируса гепатита В.

Диагностика  ко-инфекции или суперинфекции вирусом гепатита Дельта:

  • HDVAg
  • HDVAb
  • HDVAb, IgM.

При положительной реакции  на HCVAb, необходимо дополнительное исследование:

  • HCVAb, IgM
  • HCVAb белковый спектр в ИФА или иммуноблоте
  • HCV, RNA

Для оценки прогноза развития гепатита С и ответа на интерферонотерапию рекомендуем проводить типирование HCV.

    Диагностические  маркеры вирусных гепатитов и клиническая интерпретация полученных результатов

Маркер

Определение

Клиническая интерпретация

Маркеры  гепатита  А

HAV, RNA RNA вируса гепатита А Обнаруживаются в кале в первые дни после заражения.
HAVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита А Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите А
HAVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита А

Маркеры  гепатита E

HЕVAb, IgG/IgM Суммарные антитела против белков вируса гепатита Е Свидетельствуют об острой инфекции или перенесенном гепатите Е
HEVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита Е

Маркеры  гепатита В

HBsAg Поверхностный протеин вируса гепатита В Ранний маркер острого гепатита В (появляется через 3-5 недель после заражения), присутствует при хронической, в т.ч. бессимптомной  инфекции
НВsAb Антитела против HBsAg  Перенесенный гепатит В, наличие защитного иммунитета, появляются также после вакцинации
HBcAb Суммарные антитела (IgM и IgG) против  ядерного cor-белка вируса гепатита В (HВcAg в сыворотке  практически не выявляется) Маркер контакта с вирусом и  острая, хроническая или перенесенная инфекция. Важен в диагностике НВs – негативного гепатита. Антитела к НBc не являются защитными
HBcAb, IgM Ранние антитела класса IgM против HBcAg Маркер острой инфекции и продолжающейся репликации вируса
HBeAg Внутренний протеин вируса, кодируется общим с cor-белком геном вируса, но в отличии от HBcAg, HBeAg хорошо растворим и выявляется в сыворотке с момента репликации
HBeAb Антитела против HBeAg
HBV, DNA DNA вируса, прямое определение в ПЦР или реакции молекулярной гибридизации Свидетельствует об активном размножении вируса, и высокой инфекционности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита В. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии

Маркеры  гепатита D (дельта)

HDV, RNA RNA вируса гепатита Дельта Наличие HDV RNA свидетельствует об активности процесса и коррелирует с максимумом воспалительно-некротических изменений в печени и экспрессией HDV RNA в тканях органа. Тест полезен при проведении противовирусной терапии
HDVAg Антиген (специфический белок) вируса  Дельта Маркер  репликации и острой инфекции вирусом Дельта
HDVAb, IgG/IgM Суммарные антитела  против белков вируса гепатита Дельта Маркер контакта с вирусом Дельта (острая или хроническая коинфекция)
HDVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков вируса гепатита Дельта Маркер  острой инфекции вирусом Дельта

Маркеры  гепатита С

HСVAb, IgG/IgM Маркер контакта с вирусом C  (острая, хроническая или перенесенная инфекция)
HCVAb, IgM Ранние антитела класса М против белков (core  или  NS 4)  вируса гепатита C Маркер  острой инфекции вирусом гепатита С. Показатель для назначения терапии препаратами интерферона
HCV Western blot подтверждающий Суммарные антитела к отдельным поверхностным и внутренним белкам вируса гепатита С: core, E1, E2, NS3, NS4, NS5 Подтверждающий тест. Дифференциальная диагностика  стадий  инфекции вирусом гепатита С и определение целесообразности терапии препаратами интерферона
Свидетельствует об активной репликации вируса и высокой вирулентности. Важен для диагностики мутантных форм гепатита С. Один из основных показателей для назначения терапии препаратами интерферона, маркер эффективности терапии.

Маркеры  гепатита G

HGVAb, IgG Антитела класса против белков вируса гепатита G Острая инфекция или перенесенный гепатит G
HGVAb, IgM Ранние антитела класса IgM против белков вируса гепатита G Острая инфекция вирусом гепатита G

Рекомендуемый объем  предвакцинального обследования: Перед проведением  вакцинации к вирусу гепатиту В необходимо  провести исследование:

  • HВsAg
  • HВsAb
  • НВсAb

Выявление высокого титра защитных антител: HВsAb свидетельствуют об уже перенесенной инфекции, наличии  устойчивого иммунитета и об отсутствии необходимости в вакцинации. Положительные реакции  на HВsAg, и  НВсAb  свидетельствующие о наличии  инфекции требуют индивидуального решения о целесообразности введения вакцины.

Источник: USAID, Ministerul Sanatatii al Republicii Moldova.  Diagnosticul de laborator al Hepatitelor virale B, C si D. Instructiuni metodice, 2007

В случае отрицательных реакций при выявлении маркеров вирусных гепатитов А, В, С и D следует исключить гепатиты, вызванные вирусами Эпштейна-Барр и цитомегалии:

  • CMV, IgG
  • CMV, IgM
  • EBV Early Antigen, IgG
  • EBV Nuclear Antigen, IgG
  • EBV VCA (капсидный антиген), IgG
  • Epstein Barr Virus VCA (капсидный антиген), IgM

Для определения вируса гепатита, получения информации о происхождении болезни, условиях и причинах возникновения проводится серодиагностика гепатита с, b, a. Выявление серологических маркеров позволяет поставить диагноз и предпринять правильное лечение. К маркерам относятся вирусные белки, специфичные антитела, которые вырабатывает организм как ответ на инфекцию и нуклеиновые кислоты вируса.

serodiagnostika-gepatitov-700x467.jpg

Что это такое?

Серодиагностика — распознавание этиологии заболеваний способом выявления антител в крови. Серологические маркеры относятся к поздней диагностике, так как реакции возможны на 10−12 дней от начала болезни. Серодиагностические исследования проводят, чтобы:

  • диагностировать заболевание — определить наличие антител в крови, используя стандартные антигены;
  • определить возбудитель — выявить неизвестные антигены.

Для проведения серодиагностики используют: бактериальные клетки; плазмоциты и лимфоциты, опухолевые и пораженные клетки; растворимые компоненты. Выделяют 6 групп серологических реакций:

  1. Реакции, которые происходят с укрупнением частиц Ag.
  2. Реакции связывания комплемента и иммунный гемолиз.
  3. Реакция иммунофлюоресценции.
  4. Реакции нейтрализации Anti.
  5. Реакция с фагоцитозом.
  6. Реакции иммуносорбентного анализа с применением антигенов и антител.

Вернуться к оглавлению

Что показывает анализ?

Проведение серодиагностики назначают больным, если по каким-то причинам нет возможности провести диагностику, исключающую заболевание. Анализ выявляет тип возбудителя инфекции и помогает поставить диагноз. Также серодиагностика позволяет подобрать наилучший вариант лечения. Симптомы для сдачи анализа: необоснованные приступы слабости, плохой аппетит, тошнота, изменение цвета каловых масс и урины, желтизна кожи. Своевременная серодиагностика подтверждает или опровергает инфицирование и определяет стадию заболевания.

Вернуться к оглавлению

Особенности серодиагностики и вид гепатита

serodiagnostika-gepatitov1-300x204.jpg
Иммуноферментный анализ для серодиагностики гепатита С.

Оболочка каждого вируса имеет собственный набор белков. А аминокислоты, которые составляют белок, считаются своеобразным кодовым набором. Этот код и является маркером при серодиагностике. Маркерами гепатита А являются anti-НАV IgM и IgG. Маркерами гепатит В — HBcAg, HBsAg, HBeAg. Маркерами вируса С — HBCAg. Для проведения серодиагностики на вирус А применяют: ИЭМ (иммуноэлектронную микроскопию), РСК (связывания комплемента), РИА (применение меченых Anti и Ag), РЭМА (реакцию энзим антител). Серодиагностика на вирус В использует РИА, РЭМА, РПГ (преципитация в геле) и РИГА (непрямая гемагглютинация). При реакции РИГА используют эритроциты, которые нагружены HBsAg. Для серодиагностики гепатита С применяют иммуноферментный анализ.

Вернуться к оглавлению

Маркеры гепатита A

Исследование при гепатите А нацелено на определение IgM и IgG. Данные показатели появляются в крови как только уровень сывороточных ферментов в организме увеличивается. Anti-НАV IgМ — является показателем уровня антител М к вирусу гепатита. После инфицирования показатель вырастает и пока не появятся первые симптомы, анализ крови будет показывать положительный результат. Аnti-НАV IgG — данный класс определяется через 10 недель после попадания инфекции в организм. Показатель чаще всего остается высоким и после выздоровления, он свидетельствует о том, что начинается процесс формирования иммунитета к вирусу типа А.

С помощью маркера HBsAg можно выявить гепатит B на самом раннем этапе, антиген проявляется на 27−41 день после попадания инфекции в организм.

Вернуться к оглавлению

Маркеры гепатита B

Исследование нацелено на выявление антигенов и антител. Серодиагностика позволяет поставить диагноз и спрогнозировать исход болезни. Для каждой стадии, обнаруживается разный маркер HBV. На протяжении инкубационного периода антиген сохраняется в крови от 2 до 5 месяцев. Показателем инфицирования является одновременное определение HBs и НВс. В начале восстановления из крови исчезают HBc и HBe, образуется anti-НВс, позже в крови определяются антитела ко всем типам антигена. Наличие HbsAg говорит о заражении, если антиген есть в крови больше полугода, значит, заболевание находится в хронической стадии. Anti-HbsAg — показывает, что в организме образовались антитела и иммунная система активно борется с вирусом. HbsAg выявляется еще некоторое время после выздоровления. Anti-HbcAg выявляется с проявления симптомов и продолжается на протяжении всего периода.

markery-gepatita-b-300x225.jpgПри лабораторных исследованиях выявляются два класса антитела: IgM — синтезируется на ранних сроках и является признаком недавнего заражения или большой активности вируса. IgG — формируются через 2−3 месяца после инфицирования, обеспечивает иммунитет. Показатель HbeAg говорит об активности инфекции. Пациенты, у которых в крови обнаружен антиген — опасны для передачи вируса, поэтому должны соблюдать осторожность. При выявлении Anti-HbeAg, начинает формироваться иммунитет.

Вернуться к оглавлению

Маркеры гепатита C

Вирус гепатита С размножается неактивно, поэтому возникают трудности в диагностике инфицирования. Единственный способ выявления вируса С — определение РНК. Его определение проводят способом иммуноферментного анализа, выявляя количество Anti-HCV. Антитела определяются через 4−6 недель после попадания вируса в кровь. В этот период начинается формирование и циркуляция IgM. Через 3 месяца начинается синтез IgG. Длительное обнаружение IgM говорит об активности вируса и хронической стадии болезни. При хронической форме выявление IgM свидетельствует о поражении печени. Результат иммуноферментного анализа не является основанием для постановки диагноза, метод используется как скрининговый тест для выявления хронической формы. Обнаружив антитела к HCV и при подозрении на гепатит С необходимо пройти комплексное лабораторное обследование.

Иммуноферментный анализ серодиагностики позволяет обнаружить антитела к гепатиту С в 95% случаев хронической формы, при острой форме — точность метода 50−70%.

Серодиагностика не имеет 100% специфичности и чувствительности при диагностике вирусных гепатитов. Поэтому при оценке результатов необходимо учитывать симптоматику и использовать для диагностики несколько тестов, подтверждающих полученный результат. При оценке результатов серологических исследований следует учитывать анамнез заболевания, сведения о перенесенных заболеваниях и вакцинации, а также возможный контакт с источником инфекции.

Вирусный гепатит – тяжелая патология печени, которая приводит к различным осложнениям – фиброз, жировая инфильтрация, циррозное поражение. Лечебный эффект напрямую обусловлен своевременностью терапии, поэтому важно как можно раньше диагностировать опасное заболевание.

Маркеры гепатитов – одно из исследований, которое позволяет диагностировать недуг на ранней стадии развития. Оно базируется на выявлении специфических антигенов и антител, которые находятся в сыворотке крови.

Маркеры и их назначение

Особенность вирусных гепатитов в том, что на фоне раннего развития они не проявляются негативной симптоматикой. Когда проявляются симптомы, с которыми пациент идет к доктору, в большинстве случаев уже имеются функциональные нарушения печени.

Маркеры вирусного гепатита B и C – это специфические антигены и антитела в крови. Их определение в сыворотке крови подтверждает наличие патологии. Их можно обнаружить на фоне раннего развития болезни.

Чтобы выявить специфические и серологические маркеры к вирусным гепатитам, в медицинской практике используют разные исследования:

  • Иммунохимическая реакция крови посредством ИФА.
  • Реакция иммунной системы на вирусные инфекции.
  • Специализированное скрининговое исследование.
  • Иммунологические методики.

В зависимости от целей диагностики врачи назначают два вида исследований – специфический и неспецифический.

Специфическое исследование

Анализ на маркеры гепатита B и C позволяет выявить вид вирусной инфекции, который стал причиной заболевания. Специфическими маркерами выступают антигены гепатитов. Под антигенами понимают отдельные части вируса.

Когда они попадают в благоприятную среду – человеческий организм, то активно участвуют в формировании новых вирусных клеток, что приводит к быстрому прогрессированию патологии.

Неспецифическое исследование

К этому типу маркеров вирусных гепатитов относят антитела к имеющимся антигенам в крови больного. Такой вариант диагностики базируется на возможности организма продуцировать антитела – клетки иммунной системы, которые ориентированы на борьбу с патогенным возбудителем.

Если было выявлено наличие антител к антигенам, то это значит, что имеются патологические процессы в печени.

Маркеры разных видов гепатита

На фоне лабораторной диагностики вирусных гепатитов определение маркеров – один из достоверных способов, позволяющих на ранней стадии выявить болезнь.

Гепатит B

Тяжелое заболевание. На ранней стадии отсутствуют негативные симптомы, морфологические признаки на УЗИ; основной путь передачи инфекции – парентеральный. Однако с помощью маркеров на ранней стадии можно диагностировать заболевание.

В таблице представлены маркеры, которые присутствуют в крови больного на фоне заражения гепатитом B:

Антитела вирусной болезни HBeAg и HBsAg
Антитела к антигенам анти-HBs, анти-HBe, анти-HBc

С помощью алгоритма иммуноферментного исследования не только подтверждают отсутствие/наличие заболевания, но и выявляют стадию патологического процесса. Благодаря этому можно составить более точный прогноз, назначить результативную терапию.

Гепатит C

Среди всех гепатитов считается наиболее опасным. Согласно статистике, в мире более 150 млн людей, имеющих патологию в анамнезе.

Каждый год умирает свыше 350 тыс. человек.

Плохая статистика обусловлена периодом инкубации недуга – отсутствием симптоматики либо их незначительным проявлением.

Выявить гепатит в организме можно посредством таких маркеров:

  1. HCV-RNA. Присутствует наличие в крови и печеночных тканях, когда патология находится в острой стадии. Определяется даже сразу после заражения.
  2. Anti-HCV total (совокупные антитела). В крови можно диагностировать через 6 недель после инфицирования. При положительном результате говорят о вирусном агенте в организме. Обнаруживаются даже после полного излечения.
  3. Anti-HCV core IgG. В крови больного определяются только спустя 11 недель после инфицирования. Наличие IgG свидетельствует о хронической форме патологии.
  4. Anti-NS3. Всегда выявляются в крови на фоне острого течения патологического процесса.

Маркеры anti-NS4 и anti-NS5 выявляются только в запущенных случаях, когда наблюдаются функциональные поражения печени. После терапевтического курса их количество уменьшается – это говорит об эффективности проводимой терапии.

Болезнь Боткина и гепатит E

Болезнь Боткина – патология, характеризующаяся острым течением.

Распространенная причина инфицирования – несоблюдение элементарных правил гигиены.

К характерной симптоматике относят:

  • Пожелтение кожного покрова (не всегда, но в большинстве картин).
  • Нарушение работы железы.
  • Увеличение температуры тела.
  • Боль в правом боку.

Какой-либо особенной подготовки к исследованию не проводится, желательно сдавать кровь натощак. Болезнь отличается быстрым течением, отсутствием тяжелых осложнений, простотой терапии.

При исследовании на болезнь Боткина определяют такие маркеры:

  1. РНК вирусного возбудителя. Признак того, что вирус стремительно размножается.
  2. Свидетельствует о самом факте вирусного заражения.
  3. Анти-ВГА IgG. Или патология в анамнезе, либо наличие иммунитета к болезни Боткина.
  4. Анти-ВГА IgM – острый вирусный процесс.

Гепатит E получил широкое распространение в странах с жарким климатом. Причина – антисанитарные условия проживания людей. Приводит к нарушению функциональности тракта пищеварения, боли в области правого ребра. Расшифровывать маркеры гепатита E должен врач.

В таблице представлены основы расшифровки:

Маркер Описание
РНК Положительный результат – следствие активного распространения возбудителя
Ag Подтверждение гепатита E
Анти-ВГЕ IgM Острый патологический процесс
Анти-ВГЕ IgG Перенесенное заболевание, наличие иммунитета

Гепатиты D и G

Под разновидностью D понимают антропонозную инфекцию, диагностируют только совместно с гепатитом типа B.

Симптоматика этих видов похожа, однако когда присоединяется форма D, возрастают риски скопления свободной жидкости в брюшной полости, выраженной отечности.

Маркеры гепатита с расшифровкой анализа:

  • РНК – активное распространение инфекционного процесса.
  • Анти-ВГД IgM – будет означать острое течение.
  • HDAg – наличие заболевания, если результат отрицательный – вируса нет.
  • Анти-ВГД IgG – пациент ранее болел, есть иммунитет.

Разновидность G возникает только совместно с другими гепатитами в анамнезе человека – при формах B, C, D. Так как симптоматика проявляется только в исключительных случаях, чаще всего протекает в хронической форме.

ИФА позволяет выявить наличие вируса, а ПЦР показывает количественные характеристики. Для диагностики недуга используется несколько методов в совокупности. Прогноз благоприятный при своевременном обнаружении, усугубляется, если присутствует алкогольное/аутоиммунное поражение печени, ВИЧ-инфекция, СПИД и др. тяжелые заболевания.

Стоимость анализов

При подозрении на гепатит пациент получает рекомендации от доктора по поводу диагностики; анализы можно сделать в частных лабораториях, например, Инвитро, Гемотест и др.

Примерная цена исследований:

  1. Анализ на определение болезни – выявление anti-HAV IgG – качественное исследование – 600 рублей, срочно 1000 рублей. При качественном анализе результат отрицательный или положительный.
  2. Количественное исследование на гепатит B путем определения anti-HBs 800 рублей (в результате будет конкретная цифра).
  3. Диагностика гепатита C обойдется в 1500 рублей (два исследования).
  4. Качественное ПЦР исследование гепатита B стоит около 1000 рублей, а количественное 4000 рублей. Ультрачувствительный качественный анализ – 3000 рублей, а количественный 3800 рублей.
  5. Исследование на предмет устойчивости возбудителя к средствам противовирусного свойства – 12 000 рублей.

При выявлении заболевания дополнительно назначаются другие исследования, чтобы оценить состояние печени. Принцип лечения подразумевает комбинированную схему, в которую входят гепатопротекторы (средства улучшают работу печени), ферменты, противовирусные препараты, антибиотики (если выявлен инфекционный процесс) и др. лекарства.

О возбудителе HCV-инфекции стало известно сравнительно недавно. До начала 1990-х годов точное выявление заболевания представляло собой серьезную проблему. Это обусловило широкое распространение вируса при гемотрансфузионных процедурах и трансплантации органов, длительное течение инфекции без адекватной терапии. Но сейчас диагностика гепатита С точна, анализы помогают прогнозировать эффективность терапии, а срок выполнения специфических исследований не превышает 3–5 дней. 

9259-1.jpg

Так почему масштабы распространения HCV некоторые специалисты сравнивают с эпидемией? В современном российском законодательстве предусмотрена регулярная проверка на гепатит С методом ИФА как у людей из группы риска, так и у работников, способных инфицировать других. Тем не менее, многие не проходят регулярной диспансеризации и не сдают даже стандартные клинические анализы, не говоря о специфических исследованиях.

Содержание:

Но HCV далеко не всегда сопровождается какими-либо клиническими проявлениями, более того, характерные симптомы заболевания отмечают только у четверти пациентов. Вирусная инфекция обычно протекает медленно, но репликация возбудителя патологии происходит постоянно. В результате наступает необратимая гибель гепатоцитов. На месте клеток, утративших свои функции, появляются участки соединительной ткани – своего рода шрамы. 

Таким образом развивается фиброз, который, если не предпринять лечебных мер, перерастает в цирроз печени – тяжелое заболевание, сопровождающееся нарушением работы всех внутренних органов. При диагностике на этой стадии можно избавиться от вируса. Однако изменения печеночной паренхимы остаются необратимыми. В некоторых случаях больным требуется срочная трансплантация печени, а лечение начинают после проведения операции. 

Поэтому чем раньше поставлен точный диагноз, тем скорее доктор начинает терапию. Таким образом репликацию вируса останавливают еще до развития тяжелых осложнений. Однако обычных клинических исследований недостаточно для выявления инфекции. Необходимо сдать более специфичные анализы, отличающиеся как по технике выполнения, так и по особенностям расшифровки результатов. 

Сделать ряд диагностических тестов можно самостоятельно, но интерпретировать полученные данные (особенно если они положительны либо сомнительны) должен только врач.

Как определить гепатит С?

Заподозрить наличие инфекции можно по некоторым клиническим признакам. К их числу относят:

  • постоянное чувство слабости;
  • астенический синдром;
  • непереносимость физических нагрузок (ранее привычных);
  • сонливость;
  • эмоциональная раздражительность;
  • расстройства пищеварения различной интенсивности (могут отсутствовать, иногда проявляются в виде отсутствия аппетита, тошноты).

Но подобные симптомы не могут достоверно выявить HCV, так как данные признаки не специфичны и указывают на множество других патологий или обычное переутомление.

Как определить гепатит С у взрослых и у детей:

  • по анализу крови на содержание определенных иммуноглобулинов (ИФА);
  • по результатам исследования, проведенного методом полимеразной цепной реакции;
  • по биохимическому анализу на содержание печеночных проб, билирубина.

9259-2.jpg

Недавно на фармацевтическом рынке появились диагностические наборы, позволяющие провести анализ на наличие гепатита С в домашних условиях. Подобные тест-системы менее чувствительны, чем исследования, проводимые в лаборатории. Но в целом, это быстрый и достаточно точный способ самодиагностики. 

Интерпретация результатов, особенно сомнительных, должна проводиться врачом. Положительный тест служит показанием для консультации доктора. 

Дополнительно необходима проверка показателей общеклинического теста крови и мочи. Перед началом лечения доктор оценивает состояние печени по данным неинвазивных исследований (УЗИ, эластометрия). При подозрении на тяжелые поражения ткани выполняют биопсию органа. 

Основные методы лабораторной диагностики

Учитывая длительное бессимптомное течение, результаты обычного анализа крови и мочи могут быть без каких-либо отклонений. Поэтому для выявления вируса гепатита Ц используют серологические (ИФА) и молекулярные (ПЦР) методы лабораторной диагностики. Для этого сдают кровь из вены в частной лаборатории либо поликлинике по месту жительства. Срок получения результатов – до 5 дней.

Подробнее о диагностике заболевания

Инкубационный период  Вирус  Расшифровка количественного анализа  Маркеры  Anti-HCV  Вирусная нагрузка  Экспресс-тест  Ложноположительный анализ  Антитела  ПЦР  Anti-HCV-total

Когда можно обнаружить HCV в крови?

Основные методы диагностики патологии можно разделить на две группы. Молекулярные исследования направлены на обнаружение частиц вируса. Помимо наличия РНК возбудителя гепатита С, такой анализ показывает его количественное содержание и точный генотип. Серологическое исследование (ИФА) «реагирует» на выработку иммуноглобулинов, синтезируемых при попадании вируса в кровь человека. 

Уровень РНК, достаточный для лабораторного определения, достигается через 10–16 дней после инфицирования (если проводить диагностику современными высокочувствительными технологиями). Количественно вирусную РНК можно определить позже, через 4–6 недель после заражения. Тогда же целесообразно проводить и генотипирование. Синтез антител начинается сразу же, при первом контакте вируса с кровью человека. Но лабораторным путем при помощи анализа ИФА их можно обнаружить только через 3–4 недели. 

Возможность выявления вируса на ранних стадиях зависит от индивидуальных особенностей больного – сроков выработки антител и активности процессов репликации вируса. 

Какие анализы сдают при подозрении на гепатит С:

  • биохимия крови, печеночные пробы (отклонения от нормы могут лишь косвенно указывать на наличие гепатита С);
  • ИФА;
  • ПЦР.

Грамотное поэтапное полное обследование способствует исключению неопределенных результатов, дает максимально точную картину здоровья пациента в целом и позволяет врачу назначить правильное лечение. 

ПЦР диагностика

9259-3.jpg

Исследование методом ПЦР – самый точный анализ для обнаружения гепатита С в организме. Сам принцип постановки полимеразной цепной реакции достаточно сложен. Для проведения необходим обработанный и соответствующим образом подготовленный образец биологического материала. К нему добавляют фермент, провоцирующий деление заданного участка РНК (при его наличии) в геометрической прогрессии. Впоследствии определение частиц вируса проводят при помощи различных физико-химических методов.

Основные отличия ПЦР-диагностики гепатита C от исследования путем иммуноферментного анализа приведены в таблице:

Молекулярный тест, проведенный по методике ПЦР Иммуноферментный анализ
Мишени для исследования
РНК вируса в крови Антитела к гепатиту С (класса G и М)
Разновидности анализа и изучаемые критерии
Качественный анализ позволяет ответить на главный вопрос, здоров человек или болен Anti HCV Total определяет в крови общий титр всех антител к возбудителю гепатита С вне зависимости от класса
Количественное исследование оценивает вирусную нагрузку Определение иммуноглобулинов по классам: обнаруженные маркеры IgG свидетельствует о хронической инфекции, IgM – об острой
Генотипирование служит для выявления разновидности патологии Антитела с белку core и неструктурным протеинам HCV – это развернутый анализ, назначается нечасто, служит для дифференциальной  диагностики инфекции с другими заболеваниями, прогнозирования особенностей течения и исхода
Сроки диагностики
до 3 дней 3–5 дней
Сроки обнаружения (с момента инфицирования)
10–14 дней Через 3–4 недели
Вероятность получения ложных результатов и ошибочной расшифровки
Минимальна, ошибки могут быть связаны с неправильной подготовкой образцов либо нарушением правил постановки реакции Неправильные результаты (ложноотрицательные или ложноположительные) могут быть следствием определенных заболеваний и состояний (например, беременности, аутоиммунных патологий, ВИЧ, системных инфекций и т.д.)

Качественное исследование

Качественный анализ, предназначенный для выявления патогенной РНК строго специфичен, поэтому используется для дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита С и для первичного определения наличия заболевания. Современные наборы реактивов, используемые для проведения исследования, характеризуются высокой чувствительностью. Достоверная диагностика возможна уже через 1,5–2 недели после инфицирования.

Расшифровка анализа не отличается сложностью. Если частицы вируса обнаружены, человек болен либо произошла реконвалесценция болезни. Отрицательный результат свидетельствует в пользу отсутствия патологии или о диагностическом окне, когда человек заражен, но уровень РНК патогена слишком низок для лабораторного обнаружения. 

При помощи качественного анализа методом ПЦР возможна ранняя диагностика вирусной инфекции.

Количественный анализ

Исследование проводится после подтверждения диагноза гепатита С по качественной ПЦР. По анализу определяют показатель вирусной нагрузки. Этот параметр определяет активность патологического процесса. В зависимости от результата количественного анализа выделяют несколько уровней вирусной нагрузки (представлено в таблице).

Уровень вирусной нагрузки (измеряется в МЕ/мл) Расшифровка
Ниже 3ˑ104 Низкая виремия
3ˑ104–8ˑ105 Средняя виремия
Сверх 8ˑ105 Высокий уровень виремии

Чем выше параметр вирусной нагрузки (ВН), тем активнее происходит репликация вируса, хуже прогноз и выше вероятность необратимых изменений структуры тканей печени. Как правило, высокая виремия сопровождается достаточно характерными клиническими проявлениями инфекции. Обнаружение низкой ВН, особенно на фоне острой фазы заболевания является предиктором самостоятельного выздоровления. В таком случае начало терапии откладывают на 7–14 дней, после чего исследование повторяют. 

Генотипирование

Данный анализ проводят только в том случае, если в крови обнаружена вирусная РНК и установлено ее количественное содержание. Генотипирование – единственное исследование, которое определит разновидность возбудителя гепатита С. Только так можно правильно назначить курс терапии и установить продолжительность их применения. 

Экспресс-тестирование в домашних условиях

В настоящее время диагностика вирусной инфекции возможна дома, при этом человеку не нужны какие-либо специальные медицинские навыки. Экспресс-тест на гепатит С «работает» по принципу иммуноферментного анализа, то есть набор позволяет определить наличие антител к HCV в образце биологического материала. Большинство тест-систем предназначены для проверки крови. Но появились наборы, позволяющие выяснить, есть ли иммуноглобулины к гепатиту С в слюне.

Относительно достоверности экспресс-тестов было проведено несколько клинических исследований. Установлено, что подобные наборы – не самый точный способ диагностики инфекции, многое зависит от правильности забора биологического материала, соблюдения других правил выполнения анализа. Однако проведение такого теста дает возможность самостоятельно определить инфицирование, не посещая доктора и лабораторию. 

Цена одной тест-системы, позволяющей проверить наличие вируса, колеблется в пределах 800–2000 рублей в зависимости от производителя и способа выполнения анализа. Исследование выполняют следующим образом. На тест-полосу наносят образец биологического материала (слюна либо кровь) и ждут отведенное время. Появление одной контрольной полоски свидетельствует об отрицательном результате, две линии – о возможном инфицировании.

Подготовка к сдаче анализов

При подготовке к проведению обследования необходимо соблюдать такие правила:

  • исключить токсическое влияние алкоголя на печень (отказаться от употребления спиртного за 5–7 дней до сдачи анализов);
  • соблюдать диету с ограничением жирных, жареных, копченых блюд (стол №5) за неделю до проведения обследования;
  • сдавать кровь строго натощак (прием пищи запрещен за 12–14 часов до забора крови);
  • не курить за 8 часов до исследования.

Существует несколько способов проведения диагностики. Можно сдать кровь в частной лаборатории, где не требуется направлений от врача. Необходимые тесты выполняют по полису страхования, но перед этим придется получить направления у участкового терапевта или инфекциониста. 

Изменение показателей крови

Нередко пациенты интересуются, покажет ли общий анализ крови гепатит С, ведь общеклинические исследования сдаются регулярно при вирусных заболеваниях и других, более распространенных инфекциях. Но изменения картины крови возникают далеко не всегда. Кроме того, подобные нарушения неспецифичны и не позволяют провести точную диагностику заболевания.

Приблизительно в 20–30% случаев возникают следующие изменения:

  • снижение общего уровня лейкоцитов за счет лимфоцитов;
  • уменьшение содержания гемоглобина;
  • изменение уровня тромбоцитов за счет нарушений свертывающей системы крови;
  • повышение параметров скорости оседания эритроцитов.

Еще одним способом, как обнаружить вирусное поражение печени, служат показатели биохимического исследования крови.

О возможном инфицировании свидетельствует повышение концентрации:

  • билирубина;
  • АЛТ;
  • АСТ;
  • креатинина;
  • альбумина. 

Нарушения функциональной активности печени проходят по мере приема противовирусных препаратов. 

Диагноз гепатита С не ставят на основании результатов печеночных проб и стандартного клинического исследования крови.

Как выявить осложнения

Для получения полной картины состояния пациента необходимо проведение дополнительных инструментальных исследований. Это связано с длительным бессимптомным течением патологии. Нередко о наличии болезни пациент узнает на стадии фиброза, а при неблагоприятном прогнозе – на этапе цирроза либо злокачественной малигнизации гепатоцитов. 

От состояния печени во многом зависит тактика терапии. При декомпенсированных формах цирроза прием таргетных противовирусных препаратов дополняется рибавирином, либо продолжительность лечения увеличивают до 24 недель.

Биопсия печени

Процедура проводится для определения стадии и степени цирроза, а также подтверждения злокачественного перерождения клеток (предварительно опухоль обнаруживают при помощи ультразвукового исследования). Пункцию выполняют в условиях стационара под местной анестезией. 

Под контролем УЗИ специалист делает прокол и вводит в паренхиму печени специальную иглу с системой захвата, позволяющей взять образец биологического материала. Кусочек ткани помещают в специальную среду, при необходимости добавляют краситель и исследуют под микроскопом. 

Противопоказанием к проведению процедуры служит паразитарное поражение печени и тяжелые нарушения системы свертывания. Кроме того, возможность выполнения манипуляции напрямую зависит от согласия самого пациента. Для принятия взвешенного решения врач должен подробно объяснить, для чего необходимы результаты биопсии, каковы риски при проведении процедуры. 

УЗИ

Ультразвуковое исследование сочетает в себе высокую информативность, безболезненность и безопасность. В течение 15–20 минут доктор может получить подробные данные о размерах и структуре печени и других органов брюшной полости.

Как правило, УЗИ, проведенное на фоне гепатита С, демонстрирует:

  • нарушения кровоснабжения органа;
  • изменения, связанные с оттоком и секрецией желчи;
  • наличие уплотнений, очагов воспаления, некроза, в тяжелых случаях возможно обнаружение новообразований;
  • увеличение размеров печени.

По итогам УЗИ доктор поймет масштабы поражения печени, однако точная диагностика гепатита С возможна только по результатам анализа крови. 

Эластометрия

Сама техника выполнения обследования напоминает ультразвуковую диагностику. Эластометрия – неинвазивное безболезненное исследование, предназначенное для оценки плотности паренхимы печени. Таким образом доктор может определить стадию и тяжесть фиброза, при котором нормальная ткань органа замещается соединительной. Без соответствующей терапии и таргетного противовирусного лечения развивается цирроз печени.

КТ, МРТ

Подобные методики информативны при диагностике цирроза и наличия злокачественных новообразований. Томограмма имеет ряд противопоказаний. Но подобное исследование гораздо информативнее УЗИ и эластометрии, позволяет в полной мере оценить состояние печени.

Самодиагностика

Самостоятельная диагностика вируса без проведения должных исследований и их грамотной расшифровки невозможна. Человек может предположить наличие инфекции по ряду симптомов, например, повышенной утомляемости, постоянной слабости, сочетающихся с расстройствами пищеварения. К группе риска относят людей, часто подвергающихся инвазивным медицинским или эстетическим процедурам, пренебрегающими барьерными методами защиты при случайных половых контактах. 

Наиболее простой способ самостоятельной диагностики – проведение экспресс-теста либо сдача анализов в платной лаборатории. Однако при наличии характерной для вирусного поражения печени лучше пройти комплексное обследование под контролем врача. 

Обследование беременных

Обследование на гепатит С при беременности является обязательным и выполняется дважды: при первой консультации у гинеколога и постановке на учет, а затем в середине последнего триместра. Доктор назначает анализы, выполняемые по методики ИФА. Но основная проблема заключается в получении ложноположительных результатов. После зачатия в организме женщины начинается выработка протеинов, близких по структуре к антителам к гепатиту С. 

Поэтому позитивный ИФА при беременности не всегда является признаком инфицирования и требует подтверждения методом ПЦР. Также в период вынашивания ребенка возможно обследование органов брюшной полости при помощи УЗИ, иногда проводится эластометрия. Но при подтверждении диагноза лечение может навредить плоду. Поэтому назначают поддерживающие здоровье женщины медикаменты, а основную терапию начинают после родов. 

Заключение

Лечение гепатита С вполне реально как на острой, так и на хронической фазе. Но одно из условий успешной терапии – своевременная диагностика, когда еще возможно восстановление функциональной активности печени. Поэтому специалисты рекомендуют самостоятельно либо по направлению от врача сдавать соответствующие тесты, а при позитивном результате незамедлительно обращаться за медицинской помощью.

Лабораторные методики являются важным диагностическим способом в клинике инфекционных болезней. Серодиагностика гепатита C, B и A происходит по идентичным принципам. Метод определяет наличие у пациента конкретного вида возбудителя путем поиска специфических антигенов или комплексов антиген-антитело. Результаты этой диагностики помогают подобрать схему лечения.

Суть серодиагностики

Метод заключается путем поиска в крови характерных для вирусных гепатитов антигенов. Последние являются микрочастицами, имеющими индивидуальную конфигурацию и присущими каждому возбудителю. Реже выполняют определение в плазме крови антител к определенным антигенам. Реакция называется связыванием комплемента. Антитела выступают в качестве факторов иммунитета. Их продуцируют клетки лимфоциты. Для определения антител к тому или иному вирусу гепатита используются стандартные антигены.

Вернуться к оглавлению

Показания к проведению

Методика показана пациентам с такой клинической симптоматикой:

  • Пожелтение кожных покровов. Появляется при накоплении в дерме пигмента билирубина. Его высокая концентрация наблюдается при воспалении печеночной ткани.
  • Болезненные ощущения и тяжесть в правом подреберье. Увеличенная печень растягивает капсулу, провоцируя возникновение характерных признаков.
  • Повышение температуры до субфебрильных цифр, в сочетании с симптомами.
  • Мелкоточечная сыпь на кожных покровах. Она наблюдается при дефиците факторов свертывания крови вследствие печеночной недостаточности.
  • Слабость, недомогание, вялость и расстройство мышления.

Вернуться к оглавлению

О чем свидетельствует метод?

Диагностика возможна только в лабортории.

Серологический способ диагностики выявляет антигены того или иного вида вируса гепатита. Происходит это с помощью стандартных антител. Банки этих молекул хранятся в лабораториях. Антитела получают из иммунных клеток — B-лимфоцитов, а точнее, их фракции — плазмоцитов. Другой способ — выявление в крови комплексов антиген-антитело путем реакции связывания комплемента. Результат бывает ложноположительным по причине наличия у пациента ревматоидного фактора. Этот патологический белок повышается при системной красной волчанке, ювенильном артрите, анкилозирующем спондилоартрите и подагре. Больным с перечисленными сопутствующими недугами следует делать повторную сверку для достоверного результата анализа.

Вернуться к оглавлению

Как проводится метод?

Серология на вирус гепатита A проводятся с помощью ИЭМ — иммуноэлектронной микроскопии. Реже применяют РСК — реакцию связывания комплемента. Как альтернативный метод, используется РИА с мечеными Anti и Ag. Новинкой лабораторной диагностики является РЭМА — реакция энзим-антител. Серологическая диагностика на гепатит В включает реакции РИА, РЭМА и РПГ, при которой происходит преципитация в геле. Реже используется РИГА с непрямой гемагглютинацией. При ней с диагностической целью применяют эритроциты, нагруженные HBsAg.

Только для серологической диагностики гепатита C выполняют иммуноферментный анализ (ИФА).

Вернуться к оглавлению

Результаты при разных формах гепатита

Итогом серологических исследований при различных подтипах вируса является поиск маркеров. Присутствие иммуноглобулина M (IgM) всегда дает сведения о наличии острой фазы заболевания у пациента, а IgG — о хроническом течении патологии, или о перенесении ее в стертой форме. Ниже представлены показатели при различных видах гепатитной инфекции:

 
Форма гепатита Искомые маркеры Краткое описание
A anti-НАV IgM Антитела к вирусу, получаемые в острую фазу заболевания
anti-НАV IgG Антитела к вирусу, получаемые в хроническую фазу заболевания
B HBcAg Внутренний антиген B
HBsAg Внешний (оболочечный или капсидный) антиген B
HBeAg Сердцевинный антиген B
C анти-HCV Антитела к вирусу C

Вернуться к оглавлению

Вирусный подтип A

Данный вид гепатита можно вылечить придерживаясь диеты.

При нем ищут anti-HAV IgM и IgG. Выполняется диагностический поиск путем реакции связывания комплемента. В результате получают иммуноглобулины острой и хронической фазы, свойственные этому подвиду. Заболевание не требует введения противовирусных препаратов. Оно лечится симптоматически и с помощью диеты. Если пациент не припоминает у себя в прошлом болезни Боткина, это не значит, что он ею не болел. Обнаружение в крови anti-HAV IgG подтвердит, что недуг протекал в стертой форме.

Вернуться к оглавлению

Вирусный подтип B

При гепатите этого вида диагностический поиск направлен на обнаружение HBcAg, HBsAg и HBeAg. Здесь применяется уже больше реакций. Одной из них является поиск ферментативных антител. Также используют преципитацию (осаждение) в гелеобразных субстанциях. Выявляют маркеры острой и хронической фаз. Параллельно определяют маркеры сателитного гепатита D. Качественная оценка анализа подтверждает наличие маркеров в крови. Количественно же результаты оценивают по принципу обратной связи: чем выше уровень обнаруженного антигена, тем легче протекает воспаление печени, и наоборот.

Вернуться к оглавлению

Вирусный подтип C

При заражении этим видом у пациента ищут анти-HCV. С целью этого диагностического поиска применяют иммуноферментный анализ. Он заключается в использовании ферментативных веществ для определения у человека антигена к вирусу гепатита C. Поскольку это заболевание чаще протекает в хронической форме, другие анализы не требуются. Поэтому для диагностики патологии хватает недели.

Рейтинг автора
5
Подборку подготовил
Андрей Ульянов
Наш эксперт
Написано статей
168
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации